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ATP测定是一种预测微生物数量技术-分析www.w88981.com,优德官方网站




来源:yiyi
时间:2018-9-18 23:10:07

ATP测定是一种预测微生物数量技术-分析www.w88981.com,优德官方网站

一种最简单ATP测定法之一是利用萤火虫的虫荧光素一荧光素酶系统测定。
在ATP存在时,用荧光检测器检测荧光素酶发射的荧光强度。萤火虫荧光素
的发光量与添加的ATP量成正比。

    在临床微生物学中,已经把ATP测定法作为一种预测微生物数量的快速
检测方法应用。在临床实验中,利用这种方法筛检尿样。该方法成功用于
菌尿症的诊断和活性淤泥中生物量的评价口,这表明它也应该适用于食品
微生物的检测。ATP法能自动测定,代表它将是快速预测食品中微生物的有
效、方法。用于食品时需克服的主要问题非微生物ATP的去除。

ATP法通过擦拭指定区域和读出荧光检测器的相对光度单位(RLU)的方式,
已成为广泛用于对食品表面进行现场监测的快速方法。由于非微生物ATP能
影响RLU读数,这些方法虽然对监控是有价值的,但是不宜用于指示菌数。

DNA探针是由来源于目的生物体的DNA序列组成,可用于检测同源的DNA或RN
A序列。在检测时,探针DNA必须和待测菌株杂交。理论上,探针包含一个
编码特定产物的序列。探针DNA必须通过某种方式标记以利于确定是否发生
了杂交。而mRNA、rRNA和质粒DNA则提供了多个目标,有助于形成更敏感的
检测系统。合成的寡核苷酸探针可能有20~50个碱基组成,在合适的情况
下,只需30~60 min即可完成杂交。
    在典型的探针操作中,未知生物体的DNA片段通过限制性内切核酸酶获
得。经过电泳分离条带后,转移到硝酸纤维素膜上,并与标记探针杂交。
温和地洗去DNA探针后,采用放射自显影方法来检测是否存在杂交产物。

(本文由上海光学仪器厂编辑整理提供, 未经允许禁止复制)

  
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