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来源:yiyi
时间:2018-3-29 23:04:53

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用于鱼种鉴定的DNA技术
  对于不能用现有方法鉴定的鱼种,DNA技术的应用令人感兴趣。与
蛋白质一样,DNA也会因加热而降解,但目前已有技术从降解片段中分
离出具有种类特异性的片段,该方法最根本的是聚合酶链反应(PCR)。P
CR能使DNA上种类特异性序列成为目标并被放大,目前大部分研究集中
在线粒体的DNA的细胞色素B基因上,因为特别是对于鱼,有很多序列可
用于比较,比如金枪鱼,已经进行了广泛的种系发生研究。DNA探针依
赖于探针序列与目标DNA片段序列之间的特异性反应。当随后的琼脂胶
电泳分离时,就能鉴定和分离DNA产物,供其他技术进一步分析。核苷
酸残基序列可以用计算机数据库测定与比较,或者用具有特异性的酶(
内切酶)降解。降解的DNA可用琼脂糖凝胶电泳分离,再在紫外光下检测
可得到一组具有荧光的谱带,只要所用的酶合适,这些谱带与蛋白谱带
一样,具有种类特异性。DNA技术的一个很大的优点是尽管由于罐藏加
工使DNA发生很大的降解,但仍有通过引物可辨认的足够材料。然而,
众所周知,在商业操作中加热程度有相当大的差异,

  而且通常会杀菌过度,因此评价鉴定罐装鱼品种的DNA技术必须考
虑这些系数。还有,也应当考虑鱼在宰后及罐装前的情况,因为在冰藏
和冷冻贮藏时,已知DNA会发生一定程度的降解。

  从罐装金枪鱼和原料金枪鱼中分离得到的DNA的典型电泳图。从所
有罐装样品中分离出的DNA都严重降解,仅有100对碱基残基。通过选择
对已知顺序的细胞色素B线粒体基因,有特异性的引物,有可能在7种具
有重要商业意义的罐头中分离到足量的PCR产物并得到它们的序列。通
过参考碱基数据库,可从它们的特定序列中鉴定出每一品种。然而,由
于罐装前金枪鱼的贮藏条件和罐藏热处理条件有很大的差异性,因此,
该方法在商品化罐藏制品方面还需要证实。

  目前也已经研究了限制性酶的应用,并且根据电泳得到的分离图谱
已经确切证实了这种简单的方法可被用于罐装金枪鱼和鲣鱼的常规物种
类鉴定

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