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来源:yiyi
时间:2017-9-4 22:00:42

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    食品中微生物分离的定性方法
  这种方法的主要目的是确定样品中是否含有特定病原体的活细胞或
芽胞。在必要时,食品中多种病原体通过特定的分离程序被检测,如沙
门菌、大肠杆菌0157:H7、单核增生李斯特菌、霍乱弧菌和志贺菌。对
于另一些病原体,如肠致病性大肠杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌和空肠弯
曲杆菌,一般不需分离程序,而使用的是计数方法。

  分离程序一般包含几个步骤,如非选择性预富集,紧接着选择性富
集,然后在含选择性和鉴别性试剂的琼脂培养基上检测。假定当与相关
联的微生物相比较时,食品通常包含低数量的病原菌,并且病原菌还可
能处于受损伤状态。食品样品(如25mL)首先在非选择性的培养液中(225
mL)预富集培养一段时间,使受损细胞得以修复,继而使其增殖以达到
中等数量(与其他许多相关微生物一起)。将部分预富集培养液接种至选
择性富集培养液中进行培养。在培养期间,特定的病原体和有亲缘关系
的微生物被认为将选择性生长并达到较高的数量,同时许多其他微生物
不会生长。取少量的富集培养液(约0.01 mL)划线接种到选择性鉴别
琼脂培养基表面,然后在特定温度下培养一定时间,直到形成菌落。根
据不同的菌落特性,能够初步检测到病原体的存在。

  它一般被认为是一个假设性检测。为进一步证实试验结果,对特征
性菌落的菌体进行纯化并使用推荐的方法对其生化反应性、与特异性抗
体的血清学反应特征、免疫色谱侧流试验或聚合酶链式反应(PCR,后文
论述)等进行鉴定。常规的分离病原体方法可能要花10~12d时间,这取
决于特定的微生物种类。

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