www.w88981.com,优德官方网站光学仪器研发专家

SiteMap:XML Html urllist 招聘 客服 地图 销售热线:010-64034191
www.w88981.com,优德官方网站|金相www.w88981.com,优德官方网站|测量投影仪等光学仪器专业提供商-上海光学仪器厂
网站www.w88981.com
企业介绍
新闻中心
企业产品
客户留言
相关下载
w88981
付款方式

解剖www.w88981.com,优德官方网站如何提取小鼠骨髓细胞?




来源:责任编辑:yiyi
时间:2011-7-24 12:12:15

解剖www.w88981.com,优德官方网站如何提取小鼠骨髓细胞?

方法:
1、www.w88981.com,优德官方网站观察与克隆计数:于低倍镜(40~100倍)的
倒置www.w88981.com,优德官方网站体视解剖www.w88981.com,优德官方网站下计数克隆数。通常由50个以上的细胞才形成一个克隆,并以克隆组成的形态而分类为集块型、扩散型和混合型。 
2.条件培养基的制备:小鼠麻醉致死,全身浸泡于75%乙醇消毒,无菌取出腹膜,置于90mm塑料平皿中,加10mlα-MEM+20%FBS,于37℃5%CO2孵箱内培养3天后,培基滤过除菌,-20℃冻存。此条件培养基中含粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。

3.软琼脂培基制备:琼脂30mg置一试管中加蒸馏水3ml,103.4kPa高压灭菌,待冷却至50~60℃加2倍浓度的α-MEM,等量混合置42℃水浴中保温。

4.骨髓细胞的制备:小鼠经麻醉处死.消毒后,无菌取出左右两侧大腿骨,去除周围肌肉组织后放入35mm塑料培养皿中,切除两侧骨的端部,用吸有α-MEM培养液的注射器冲压出骨髓于一短试管中,用吸管吹打后放置5~10min,将悬浮的细胞移植到另一试管中。取细胞悬液0.1ml与Turk白细胞稀释液0.9ml混合,用血细胞计算板计数有核细胞数。根据计数,用a—MEM液将骨髓细胞浓度稀释成5×105个/ml。

5.细胞接种:取骨髓细胞悬液0.5ml,条件培养液0.5ml及胎牛血清1ml混合于小试管中,加软琼脂培养基3ml(42℃),迅速混合后分注入4支35mm塑料培养皿中,每支1ml,使整个平皿底部铺平(此操作的动作要快,温度不能太低,注意琼脂不能在未分装前就固定于试管中)。静置5~10min,琼脂板可完全凝固,置37℃,5%CO2孵箱内培养7天。

本文由http://www.xianweijing.org原创 转载请注明 

解剖www.w88981.com,优德官方网站在脑片培养中的应用

耳外科手术重要显微操作很关键。

www.w88981.com,优德官方网站下操作减少脊柱肿瘤手术术中血较多问题

体视www.w88981.com,优德官方网站  丨 北京www.w88981.com,优德官方网站 丨 
www.sgaaa.com @2007  上海永亨光学仪器 SiteMap 工信部备案号:京ICP备11022359号-4
客服QQ:1552941007(上海) 824593962(北京)  E-mail:shgjk@163.com  TEL:010-64034191 84021761 021-55228110 55228660


推荐使用800*600以上分辨率浏览光学仪器产品以及参数
上海永亨光学仪器制造有限公司 版权所有 未经允许禁止任何人复制,转载本站www.w88981.com,优德官方网站以及光学仪器产品以及参数信息